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新生儿呼吸机相关性肺炎(VAP)与菌群

浏览: 发布日期:2018-07-25
新生儿呼吸机相关性肺炎(VAP)与菌群
 
本研究组在2007年首次报道了新生儿VAP患者气管内导管上的细菌不是孤立存在的,而是以群体形式即生物膜(biofilm)形式存在,生物膜是群体细菌形成的菌落组织以及分泌的胞外基质构成的严密组织结构,以逃避机体的免疫反应及抗生素的清除[6-7]。采用变性梯度凝胶电泳技术检测机械通气新生儿气管内导管表面生物膜细菌结构,发现生物膜细菌群落由多种细菌组成,其多样性随气管内导管放置时间延长而下降,发生VAP的危险性增加;T-A克隆后测序发现每个气管内导管表面均有克雷伯菌属存在,且以肺炎克雷伯菌为主,而痰培养仅 45%为阳性;77%标本检测出链球菌属(占36%),而痰培养则报告为“正常菌群”[8],并且由于挑取菌落的随意性及培养基的选择等因素,痰培养结果存在一定的局限性和片面性。随着高通量测序技术的应用,本研究组于2014年发现呼吸道菌群中链球菌的存在,VAP患儿气管内插管后痰中链球菌比例逐渐增加,到第5天非常明显[9],进而发现,无论是因为新生儿呼吸窘迫综合征,还是因为感染性肺炎并发呼吸衰竭接受机械通气治疗的患儿,并发VAP者气管内导管表面链球菌检出率均明显高于未发生VAP组[10]。采用16S rRNA聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳和物种特异性聚合酶链反应方法证实,与新生儿VAP发生有关的链球菌多见的菌种,为同属于草绿色链球菌的轻型链球菌(15/20)、口腔链球菌(3/20)、唾液链球菌(1/20)和肺炎链球菌(3/20)[11]。研究表明,轻型链球菌在新生儿口腔中最常见,几乎不具有致病性[12]。但轻型链球菌与VAP代表性致病菌—铜绿假单胞菌共培养,可使后者的生物膜形成及内部菌落数均增加,控制生物膜形成的关键基因和控制生物膜基本成分藻酸盐合成的关键基因的表达也增加[10]。随后本研究组证实,轻型链球菌分泌的自体诱导因子-2(autoinducer-2,AI-2)有控制上述基因的作用,并呈剂量依赖性[13],加入AI-2类似物D-核糖(ribose)可以逆转这一作用[14]。在接受机械通气治疗且并发VAP的患儿中,菌群中有链球菌与无链球菌的患儿相比,前者从插管到发生VAP的潜伏期更长,肺泡灌洗液中白细胞升高的程度没后者明显;细胞培养也表明,导管生物膜链球菌临床分离株及铜绿假单胞菌混合培养与人肺上皮细胞培养3 h,并不引起白细胞介素-8表达升高[10],提示链球菌的存在可能导致肺部炎症的慢性过程。